彈簧色譜柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流動(dòng)相和甲醇或乙腈能夠互溶。色譜柱在保存過(guò)程中有可能因為溶劑的揮發(fā)而干涸,所以在使用流動(dòng)相分析之前應使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱。如果所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,則應注意用水作為過(guò)渡,而不能直接將有機溶劑和緩沖鹽直接混合。測試結束后沖洗柱子也要注意這一點(diǎn)。還有一點(diǎn)需要注意的是不要使用純水沖洗色譜柱。對于非極性柱,比如C8和C18,由于純水不能浸潤填料表面而沖倒碳鏈,造成柱效下降。另外,分析樣品時(shí)由于純水不能浸潤填料表面形成水膜,出現樣品不保留而使分離度下降,重復性差,所以對于一般的C8和C18柱,有機溶劑的比例不應低于5%。
彈簧色譜柱的使用說(shuō)明:
(1)色譜桂使用前注意事項:
色譜柱的儲存液無(wú)特殊說(shuō)明,均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
(2)流動(dòng)相:
流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動(dòng)相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45um的濾膜過(guò)濾一次則更好,尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外,裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0,BDSC18適合于堿性化合物,PH值適用范圍為2.0-10.0。當必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí),每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,并置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。